DIGITALNA ARHIVA ŠUMARSKOG LISTA
prilagođeno pretraživanje po punom tekstu
| ŠUMARSKI LIST 13/2011 str. 134 <-- 134 --> PDF |
M. Pernek, M. Županić, D. Diminić, T. Cech: VRSTE RODAPHYTOPHTHORA NABUKVI I TOPOLAMA... Šumarski list – Posebni broj (2011), 130-137 Kako se u načelu razlikuju dvije tehnike izolacije: korijenjem, do 10 cm u dubinu. Broj i datum uzimanja izolacija iz napadnutog tkiva, teizolacija iz uzorka tla s uzoraka naveden je uTablici 1. korijenjem, paralelno su uzimani i uzorci tla s sitnim Slika 1. Tekline na deblu bukve Figure 1Bleeding on the trunk of beech Slika 2. Jezičaste nekroze ispod kore bukve Figure 2Necrosis under the bark of beech Slika 3. Jezičaste nekroze ispod kore topole Figure 3Necrosis under the bark of poplar Laboratorijska obrada i izolacija patogena Dijelovi kore su inokulirani na hranjive podloge (Tablica 1), a precjepljivanjem su izolirani sojevi pseudogljiva koji su morfološki pregledani, te pri sumnji poslani na molekularnu analizu. Uzorci tla su obrađivani metodom potapanja. Pri tome se posuda s poklopcem zapremnine 1l napunila uzorkom tla do pola, a zatim se do 3 nalila deionizirana voda. Korišteni su različiti mamci koji privlače zoospore. Mamci se stavljaju u posude nakon 3 dana. Prilikom prve izolacije kao mamac je korišten plod kruške, a dalje tijekom projektaispitana je i mogućnost korištenja ostalih mamaca koji su preporučeni za izolaciju Phytophthora vrsta (mlado lišće hrasta lužnjaka, mlado lišće rododendrona -Rhododendron catawbienseMichx. ‘Cunningham’s White’i svježi plod jabuke). Prilikom uzimanja biljnih organa koji služe kao mamac,važno je da matična biljka nije bila tretirana fungicidima, jer to smanjuje ionako malu uspješnost ove metode. Ukoliko dođe do infekcije na mamcima se razvijaju lezije, s čijih se rubova uzimaju uzorci za daljnji postupak izolacije koji je istovjetan kao i kod postupanja s uzorcima kore i tkiva sa stabala.Ti uzorci su prvo obrađenipovršinskom sterilizacijom te su takvi stavljani na više vrsta hranjivih podloga (PDA, V8). Nakon toga su se izolati u nekoliko navrata precjepljivali, kako bi se dobila čista kultura. Za ove postupke korištena je besprašna komora,kako bi se osigurali sterilni uvjeti. Izolacija uzročnika ovim postupcima daje uspješnost od 10-30 % te je bilo potrebno obraditi velik broj uzoraka kako bi dobili čistu kulturu. |